在生化研究工作中，常常需要使用緩沖液來維持實驗體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實驗體系的pH值變動或大幅度變動，酶活性就會下降甚至*喪失。所以配制緩沖液是一個*的關鍵步驟。
 

　　下面就由我來給大家講講緩沖液的配置方法：

　　只要知道緩沖對的PH值，和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度)，就能按公式計算[鹽]和[酸]的量。這個算法涉及對數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計算麻煩，已為我們總結出pH值與緩沖液對離子用量的關系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。

　　經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L)，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。

　　計算好后，按計算結果準確稱好固態(tài)化學成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。

　　各種緩沖液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標定配成準確濃度才能進行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計量都能從以上的算式準確獲得。

　　認識作用：

　　分析測試中，在絡合滴定和分光光度法等許多反應里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖液達到的，所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。 采用電位滴定法測定外加酸或堿對不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線，不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對分析測試中正確選緩沖液的配制方法及用量具有指導意義。

　　采用電位滴定法測定的滴定曲線，選擇 了常見的氨水-氯化銨緩沖液，分別按照不同的配比得到4種緩沖液，實驗測定了強酸、強堿對緩沖 溶液的滴定曲線，滴定結果直觀清晰，對理解緩沖容 量的概念及實踐中的選擇有積極的意義。

　　同時，我們?nèi)梭w的正常生理環(huán)境的維持也離不開它，認識學習有利于我們深入認識人體復雜化學反應的機制。它維持著人體正常的血液p H范圍。其中碳酸-碳酸氫鈉是血漿中主要的緩沖對，此對緩沖機制與肺的呼吸功能及腎的排泄和重吸收功能密切相關。正常人體代謝產(chǎn)生的二氧化碳進入血液后與水結合成碳酸,碳酸與血漿中的碳酸氫根離子—組成共軛酸堿對，所以它在醫(yī)學檢驗中有著重要的意義。